【生物类似药纵览】生物类似药的分析检测放行

生物药质量标准一般包括外观、可见异物、不溶性微粒、装量等物理指标，pH值、渗透压等化学指标，以及蛋白质含量、纯度、活性、肽图、糖型、工艺杂质残留、微生物等。

一般来说，物理指标和化学指标应根据《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）方法进行检测；生物药的蛋白质含量使用紫外法进行检测；纯度的检测方法包括分子排阻色谱法、疏水色谱法、反相色谱法、毛细管电泳法、离子交换色谱法及实时成像毛细管等电聚焦电泳法；活性检测方法一般包括基于细胞的生物学活性检测方法、酶联免疫检测方法等；肽图一般使用高效液相色谱或超高效液相色谱法进行检测。另外，如果是含有糖基化药物，应根据药物的作用机制，对药物的糖型进行控制。根据药物的生产工艺情况，还要对工艺相关杂质进行控制，比如宿主菌/细胞蛋白质残留、蛋白A残留、外源性DNA残留、细菌内毒素等。同时，在终产品中需要对产品的微生物进行控制。

分析方法的验证

对于标准方法（如《中国药典》方法）可只做确认，对于非标准方法应按要求进行较全面的验证。由于分析方法具有各自的特点，并随分析对象而变化，需要视具体情况拟定验证的指标。

对于生物药，含量类检测验证内容一般包括系统适用性、专属性、精密度（重复性、中间精密度）、准确度、线性、范围及耐用性等；纯度类检测一般需要进行系统适用性、专属性、线性、范围、准确度、精密度（重复性、中间精密度）、检测限、定量限、耐用性验证；鉴别类方法（如等电点、肽图等）一般需要进行系统适用性、专属性、耐用性验证；杂质类（如宿主菌/细胞蛋白质残留、蛋白A残留、外源性DNA残留）检测需要进行专属性、线性、范围、精密度、准确度、检测限、定量限、添加回收率等验证；细菌内毒素应进行供试品干扰试验；微生物检测需要进行适用性试验。

方法学验证可分阶段实施，在Ⅰ期临床试验前可进行部分验证，如专属性、精密度等；在Ⅲ期临床试验前完成全面验证。

分析检测用仪器设备

生物药物分析检测用的仪器一般有紫外分光光度计、高效液相色谱仪、超高效液相色谱仪、毛细管电泳仪、等电聚焦电泳仪、多功能酶标仪、qPCR仪、澄明度检测仪、不溶性微粒检测仪、pH计、渗透压仪等。

遵循现行版GMP法规和数据可靠性法规，QC实验室的仪器设备需要具有审计追踪功能或有相关SOP来保证数据的可追溯性。根据仪器的复杂性和检测使用目的对实验室仪器设备进行分类，按照类别使用前要进行部分或全部确认，包括安装确认、运行确认、性能确认和控制仪器设备运行的计算机的确认。实验室仪器设备使用期间要进行定期的性能确认、期间确认、预防维护以保证仪器设备使用性能的稳定性。

对照品

生物药物检测一般会用到两类对照品，一类为国际或国家对照品，比如人（牛）血白蛋白国家对照品、国际或国家活性标准品、细菌内毒素标准品、蔗糖标准品等。另一类为企业自制对照品（参考品），一般选用代表性工艺生产的样品进行制备。

在药物研发的不同阶段，会制备相应阶段的对照品。一般在申报临床试验前，会利用药理毒理批次样品制备该项目的第一代自制对照品（参考品），用来支持中试批、临床批样品的检测与放行；在临床试验期间，利用商业化规模及工艺生产的Ⅲ期临床试验样品或工艺验证样品制备第二代自制对照品（参考品），用来支持上市后产品的检测与放行。需制定自制对照品（参考品）的质量标准，按照质量标准进行检定，以及进行全面的结构、功能的表征研究；同时对蛋白质含量、活性进行标定；不同代次的自制对照品（参考品）间需要进行桥接；自制对照品（参考品）需要进行稳定性考察，制定合理的稳定性考察方案，监控自制对照品（参考品）在储存过程中的质量情况。

（摘编自《生物类似药从研发到使用》，中国医药科技出版社出版）