当加入少量强酸或强碱时，部分中和的呈弱酸性或弱碱性的溶液具有减缓其pH变化的现象，这一观察结果导致了“缓冲”概念的产生。缓冲液由一种酸和它的共轭碱组成，如乙酸和乙酸盐。一种缓冲液的质量取决于它的缓冲能力（即加入强酸或强碱时对pH变化的抵抗力）以及将其稀释或加入中性盐时的pH稳定性。
缓冲液选择
选择缓冲液需要考虑的因素很多。纯化一种蛋白质时，除了要满足工艺需求外，成本也是一个很重要的因素。同时，缓冲液对不同纯化技术的兼容性也是一个需要考虑的问题。表格列出了一些常见缓冲液及它们的缓冲pH范围。
一般根据蛋白质自身的等电点选择最佳的缓冲液及缓冲液pH。磷酸盐、醋酸盐或柠檬酸盐体系是纯化蛋白质常用的缓冲液。在确定合适的缓冲体系后，再选择缓冲体系的pH和使用浓度。
需要注意的是，缓冲液的浓度不宜太高，高离子强度可能会使蛋白质聚集沉淀或影响其活性。
生产中缓冲液的配制
实际生产中，配制缓冲液通常使用不锈钢罐。配制流程一般包括以下几个方面。
配制前准备 缓冲液配制前，应做好相应的准备工作，一般包括生产车间清场、缓冲液配制罐及缓冲液储存罐的清洗灭菌、所需管路及组件的清洗灭菌、所需物料的准备及信息核对和所用仪器（如pH计、电导率仪、电子天平台秤等）的准备及校验。
配制缓冲液 连接所用管路和相应配制罐，向配制罐中加入所需的注射水或纯化水。一般采用质量流量计来确定加入水的质量。选择合适大小的称量袋，在电子天平和电子台秤上准确称量相应的物料。将准确称量的物料投入到加好水的配制罐中，开启搅拌至物料完全溶解。从取样口取样，检测缓冲液pH值和电导是否在规定范围内，如不在范围内，要将pH值和电导调节至所需规定范围。注意缓冲液的温度会影响缓冲液的pH值和电导（如25℃时pH为8.06的Tr is缓冲液，其在0℃时pH为8.85）。
除菌过滤 为了避免微生物污染，需要对配制好的缓冲液进行除菌过滤。缓冲液经除菌级过滤器过滤后，转入缓冲液储存罐中备用。可根据配制缓冲液的体积选择合适大小的滤芯。在完成除菌过滤后，需要对过滤器进行完整性测试。
缓冲液储存 过滤后，缓冲液在生产过程中一般储存于不锈钢罐或一次性储液袋中，配制好的缓冲液应在规定的储存条件下储存，并在有效期内使用。
（摘编自《生物类似药从研发到使用》，中国医药科技出版社出版）